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          1. 液相色譜柱可以反沖嗎?

            2022-06-27 16:52:37來源:山東譜析

            很多用戶在液相色譜柱上都會看到有“->”標志,這個標志是表示流動相的流動方向,但也有部分色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣,翻譯為“決不能反沖”的意思,那么色譜柱是否可以反沖?能不能反沖爭議很大,但在我們的實踐中,使用色譜柱反沖技術修復色譜柱后,收到了柱效有所提高、柱效有所恢復的效果。那么在什么樣的情況下,我們可以讓色譜柱進行反沖技術呢?跟著譜析色譜小編一起去了解一下。

            一、分析氨基酸的離子交換柱時,使用一段時間反柱效明顯下降,用NaOH活化,仍達不到要求的,可使用NaOH反沖活化即可迅速恢復柱效,如圖:

            二、色譜柱使用一段時間后柱效明顯下降,此時可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填滿,然后用流動相反沖一下,可使柱效恢復正常,因為反沖可以改善柱頭死空間。

            三、因反沖可把沉積在過渡板上的細微顆粒沖走,有時也可用反沖技術使柱壓降低。

            反沖色譜柱的方法:

            一、如果是已經保存好的色譜柱:1、反向接柱,先用 95水:5 乙腈 0.2 ml/min,沖 20倍柱體積;然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;最后用 95 乙腈:5水,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;如果正向接柱,使用65乙腈水保存色譜柱即可。

            二、如果是剛走完樣的色譜柱,那么請按照下列步驟進行:

            1、卸掉保護柱;

            2、正向接柱,常規方法沖洗色譜柱(先95水,后95乙腈或甲醇);

            3.反向接柱,先用95水:5乙腈 0.2 ml/min,沖 20倍柱體積;然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20倍柱體積;最后用95乙腈:5水,0.2ml/min,沖 20 倍柱體積;

            4.正向接柱,用65乙腈水保存色譜柱即可。


            需注意的是:1.20倍柱體積,2504.6mm大概 80ml 1504.6mm大概48ml2.反向接柱時不要鏈接檢測器!


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