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          1. 薄層色譜法的五個操作步驟

            2022-04-23 09:24:13來源:山東譜析

            在化工領域中,有一種層析分離技術非常出名,就是薄層色譜法,也叫薄層層析,這是一種快速分離化學物質的最有效層析方法,它的工作原理就是利用吸附各成分,使其達到互相分離的目的。針對此種技術,今天譜析色譜小編就來給大家介紹一下薄層色譜法的5個操作步驟及注意事項。

            薄層色譜法的5個步驟

            步驟一:薄層板制備

            除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。手工制板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板倆種。

            步驟二:薄層板的活化。硅膠板于105-110℃烘30分鐘,氧化鋁板于150-160℃烘4小時,可得活性的薄層板。

            步驟三:點樣

            點樣方式:分為手動點樣和自動點樣。手動點樣主要器具為微量毛細管、微量注射器等。自動點樣采用半自動點樣儀或全自動點樣儀,按預設程序自動點樣。手動點樣靈活方便,常用于各種TCL鑒別中,器具以微量毛細管最常用。儀器的自動點樣準確性好,常用于薄層掃描法的含量測定。

            點樣方法:分為接觸式點樣和噴霧點樣。噴霧點樣為儀器控制,在此不展開描述。接觸式手工點樣時,應注意小心用點樣器垂直接觸薄層板表面以防止損傷板面。若薄層吸附劑表面被損壞或點成洼孔,則展開后斑點成不規則形狀;靠近溶劑前沿的化合物形成三角形,靠近原點的化合物形成新月形,影響測定結果。原點損失帶來誤差,也將使展開后的定量和判斷不準確。

            步驟四:展開

            展開劑的配制:配制展開劑時,應嚴格控制其比例準確度,如遇到比例很小的溶劑時,應盡量滿足其精確度要求,而不是為圖方便省事直接用滴管加入。展開劑配好后如果渾濁不清,不能立即使用。應轉移入分液漏斗中,待其靜置分層澄清后再取其上層(或下層)液進行展開。

            步驟五:顯色

            薄層板顯色方法有哪些?主要有三種方法,分別是蒸汽顯色法、物理顯色法和試劑顯色法。

            薄層色譜法的rf值

            rf值指的是溶質移動的距離/溶液移動的距離。表示物質移動的相對距離。

            各種物質的Rf隨要分離化合物的結構,濾紙或薄層板的種類、溶劑、溫度等不同而不同,但在條件固定的情況下,Rf對每一種化合物來說是一個特定數值。

            薄層色譜法的用途有哪些?主要有以下三大用途,一起來看看吧!

            用途一:快速分離兩種物質;

            用途二:鑒定少量有機物的組成;

            用途三:跟蹤反應進程。

            薄層色譜法的注意事項有哪些?主要有以下幾個注意事項。

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