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          1. 液相色譜儀色譜柱的選擇及維護

            2021-09-28 08:56:15來源:admin
            液相色譜儀色譜柱的選擇
             
            液相色譜儀基質的選擇大致遵循以下法則,硅膠基質的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物質,主要用來制成分子排阻和離子交換柱。
             
            色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。
             
            液相色譜儀色譜柱的維護
             
            1. 色譜柱的平衡
             
            反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得最大的"補償",
             
            2. 色譜柱的再生
             
            長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數減低)??梢詫ιV柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。
             
            建議用來沖洗柱子的溶劑體積
             
            3. 色譜柱的維護
             
            a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)
             
            b.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍
             
            c.避免流動相組成及極性的劇烈變化
             
            d.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理
             
            e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中
             
            f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

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